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iFish專業(yè)軟件是一個用于熒光原位雜交成像分析系統(tǒng),熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪制方法,使用熒光素標(biāo)記探針,以檢測探針和分裂中期的染色體或分裂間期的染色質(zhì)的雜交。熒光原位雜交技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)。它的操作操作簡便,探針標(biāo)記后穩(wěn)定,一次標(biāo)記后可使用二年。方法敏感,能迅速得到結(jié)果。在同一標(biāo)本上,可同時檢測幾種不同探針,不僅可用于分裂期細(xì)胞染色體數(shù)量或結(jié)構(gòu)變化的研究,而且還可用于間期細(xì)胞的染色體數(shù)量及基因改變的研究等。
iFish專業(yè)軟件可用于熒光原位雜交成像分析,熒光原位雜交方法的原理,即,如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的,二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報告分子如生物素、地高辛,可利用該報告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的免疫化學(xué)反應(yīng),經(jīng)熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進(jìn)行定性、定量或相對定位分析。
熒光原位雜交方法的大致步驟分為探針變性、標(biāo)本變性、雜交、洗脫、雜交信號放大(適用于適用生物素標(biāo)記的探針)、復(fù)染、封片、熒光顯微鏡觀察FISH結(jié)果。采用多種方法標(biāo)記DNA探針時,一次雜交可以同時觀察多個探針的信號,使用數(shù)字成像系統(tǒng)(CCD/CMOS),分別多次攝取的信號儲存在計算機(jī)內(nèi),通過iFish專業(yè)軟件系統(tǒng)的處理,最終形成一個復(fù)合的多顏色的圖像。